Литвинов В. В., Сулима А. Н. и др. Беременность и роды при тотальной глобозооспермии (тип 1) у мужа в программе ИМСИ с активацией ооцитов Сa2+-ионофором а23187

03.06.18г

Опубликовано в журнале «Таврический медицинский Вестник» 2018 г.

УДК 616.69-008: 618.177-089.888.11: 618.2:618.4

Литвинов В. В.1, Сулима А. Н.2,3, Маклыгина Ю. Ю.1, Гукасян М. Г.1,
Харитонова М. А.1, Ермилова И. Ю.1, Клепуков А. А.1.

Беременность и роды при тотальной глобозооспермии (тип 1)

у мужа в программе ИМСИ с активацией ооцитов

Сa2+-ионофором а23187.

1 ООО «ЭКО-центр», клиника «АльтраВита», 117186, г. Москва, ул. Нагорная, д. 4А.

2 Медицинская академия им. С. И. Георгиевского (структурное подразделение) ФГАОУ ВО «КФУ им. В. И. Вернадского», 295017, г. Симферополь, ул. Воровского, 8.

3 ООО «Медицинская клиника «Ваш Доктор», 295034, г. Симферополь, ул. Зои Жильцовой, д. 4А.

Kонтактная информация ответственного автора: Литвинов Владимир Валентинович, кандидат медицинских наук, врач акушер-гинеколог, ООО «ЭКО-центр», клиника «АльтраВита», 117186, г. Москва, ул. Нагорная, д. 4А, e-mail: lvv33@yandex.ru

Резюме

Рассматривается случай успешного лечения бесплодия у супружеской пары с тяжелой формой тератозооспермии (тотальная глобозооспермия (Тип 1). Глобозооспермия встречается редко (заболеваемость 0,1% у андрологических больных), состояние недостаточно изучено, является тяжелым расстройством сперматогенеза и приводит к 100% мужскому бесплодию в естественных условиях. Наступившая беременность и последующие роды протекали благоприятно. ИМСИ с активацией ооцитов CA2+-ИОНОФОРОМ А23187 может помочь в лечении мужского бесплодия при тотальной глобозооспермии (Тип 1) (тяжелая форма тератозооспермии).

Ключевые слова: тератозооспермия, глобозооспермия, ЭКО, ИКСИ, ИМСИ, ВРТ, Ca2+- ионофор, беременность, роды.

Litvinov V. V.1, Sulima A. N.2, 3 Makligina Y. Y. 1, Gukasyan M. G. 1, Kharitonova M. A.1 , Ermilova I. Y.1, Klepukov A. A1.

PREGNANCY AND LABOR IN CASE OF THE HUSBAND TOTAL GLOBOZOOSPERMIA (TYPE 1) AT THE IMSI PROGRAM WITH ACTIVATION OF

CA2 + -IONOPHERIC OOCYTES (GM508 CULTACTIVE)

1 LLC «ECO-Center», «AltraVita» clinic, 117186, Moscow, Nagornaya Str., 4A

2 Medical Academy named after S. I. Georgievsky (structural unit) “V. I. Vernadsky Crimean Federal University», 295017, Simferopol, Vorovsky Str., 8.

3 LLC «Medical Clinic «Vash Doctor «, 295034, Simferopol, Zoya Zhiltsova Str, 4A.

Responsible authors contact information: Litvinov Vladimir Valentinovich, Candidate of Medical Sciences, obstetrician-gynecologist, LLC ECO-Center, «AltraVita» clinic, 117186, Moscow, Nagornaya Str., 4A, e-mail: lvv33@yandex.ru

Summary

The case of successful infertility treatment in a married couple with a severe form of teratozoospermia (total globozoospermia (Type 1).) Globozoospermia is rare (morbidity 0.1% in andrological patients), the condition has not been adequately studied, is a serious disorder of spermatogenesis and leads to 100% male infertility in The IMSI with the activation of the oocyte CA2+-ИОНОФОРОМ А23187 can help in the treatment of male infertility with total globooospermia (Type 1) (severe teratozoospermia).

Key words: teratozoospermia, globozoospermia, IVF, ICSI, IMSI, IVF, Ca2+ ionophore, pregnancy, childbirth.

ВВЕДЕНИЕ

Первые успешные экспериментальные исследования оплодотворения яйцеклетки человека вне организма были проведены в СССР в 1955-1962 гг. Петровым Г. Н. в Крымском медицинском институте на кафедре гистологии и эмбриологии [1]. Позже, в 1969 г. эмбриолог Edwards R и гинеколог Steptoe P. в Кембридже заявили о «разработке» технологии ЭКО и после нескольких лет неоднократных попыток оплодотворения и переноса эмбрионов в полость матки, получили беременность, которая успешно завершилась родами 25 июля в 1978 г. (UK, Oldham, clinic Bornholl). С этого времени началась эра вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ) в мире. В России первый «ребенок из пробирки» появился в группе профессора Леонова Б. В (гинекологи – Калинина Е. А. и Лукин В. А.) в 1986 г. (г. Москва), ему принадлежит и авторство термина ЭКО (экстракорпоральное оплодотворение). На начальных этапах развития ВРТ в программы брали пациенток исключительно с трубно-перитонеальным фактором бесплодия. Позже, по мере развития технологии, с появлением аспирации сперматозоидов человека из эпидидимиса (MEZA) в 1988 г. и интраплазматической инъекции сперматозоида в ооцит (ИКСИ) в 1992 г. [2], а позже в 1999 г. методики ИМСИ (интраплазматическая инъекция «морфологически» нормального сперматозоида), разработанная группой израильских ученых, которую возглавлял профессор Б. Барту, ЭКО стало незаменимой технологией в лечении мужского бесплодия. Это позволило ESHRE в 2005 г. отнести мужской фактор бесплодия к абсолютному показанию при проведении ЭКО.

В настоящее время около 15% супружеских пар в мире страдают бесплодием: 1/3 случаев связаны с женским фактором, 1/3 – с мужским и 1/3 не имеет четких и ясных причин (идиопатическое.) По данным статистики Франции, не менее 12% сексуально активных американцев имеют проблемы с фертильностью. [3]. Согласно нашим статистическим данным 2015 – 2016 гг. (клиника «АльтраВита» ООО «ЭКО Центр» (г. Москва) и ООО «Медицинская клиника «Ваш Доктор» (г. Симферополь) процент мужского бесплодия из обратившихся на прием супругов, составляет 40% (43%), бесплодие обоих супругов 45% (49%). Возможные причины мужского бесплодия хорошо известны: варикоцеле, инфекции, ретроградная эякуляция, антиспермальные антитела, новообразования, крипторхизм, гормональный дисбаланс, дефекты семявыводящих путей, хромосомные болезни, целиакия, лекарственные препараты, травмы и операции, промышленные токсины, тяжелые металлы, радиация,  перегрев яичек, наркотики, род занятий (профессии, которые давно ассоциируются с олигоспермией и мужским бесплодием: сварщики, работники химических производств, водители-дальнобойщики и кто подолгу сидит без движения), табакокурение, эмоциональный стресс, ожирение и другие.

Исследования ВОЗ указывают, что в странах Африки заболеваемость мужским бесплодием варьирует в пределах 4,2-6,3%, в Центральной и Восточной Азии данный показатель самый низкий на планете – до 3% мужского населения. Приблизительное число бесплодных мужчин во всем мире оценивается ВОЗ в 30,6 миллиона. Развитые страны Европы и Северной Америки отличаются высокой заболеваемостью мужским бесплодием [4, 5].

К одной из редких и серьезных причин тяжелой тератозооспермии, структурной патологии сперматозоидов, относится глобозооспермия (globozoospermia). Этот дефект в сперматозоидах обнаруживается менее чем у 0,1% мужчин с бесплодием. Наиболее часто патология выявляется в Северной Африке, где на 100 случаев мужского бесплодия, один приходится на глобозооспермию [5]. Что такое глобозооспермия? Врач лаборант при исследовании эякулята визуализирует у сперматозоидов характерную округлую (или круглую) головку, отсутствие или выраженный дефект акросомы (измененный комплекс Гольджи в передней части головки мужской половой клетки, содержащий гидролазы (гидролитические ферменты), которые нужны для растворения оболочки яйцеклетки при оплодотворении). Глобозооспермия, также известна как синдром «круглой головки сперматозоида». Существует два типа глобозооспермии, описанные в литературе. Тип 1 классифицируется как тотальная глобозооспермия, из-за отсутствия акросомы у всех сперматозоидов (100%) в эякуляте. Тип 2 классифицируется как частичная глобозооспермия, но при этом соотношение сперматозоидов, имеющих акросому составляет от 20 до 60% в образце спермы [6]. Патогенез глобозооспермии до сих пор недостаточно изучен. Однако исследования последних лет показали связь данной патологии сперматозоидов с генетическими факторами. Есть сообщения о возможной связи глобозооспермии с хромосомными аномалиями. При проведении FISH диагностики сперматозоидов у пациентов с глобозооспермией уровень аненуплоидий составил 0,66%, что значительно отличается от показателей контрольной группы (0,37%). Отмечается увеличение уровня анеуплоидий по 13, 16 и 21 хромосомам.

Описаны семейные случаи глобозооспермии. Предполагаются различные варианты наследования: Х – сцепленное, аутосомно – доминантное и аутосомно – рецессивное. Выявлены мутации в трех генах, ответственные за развитие глобозооспермии: делеция в гене DPY19L2 в гомозиготном состоянии, миссен мутация в гене PICK в гомозиготном состоянии, а также мутации в гене SPATA 16 [7].

DPY19L2 – наиболее часто встречающаяся мутация при глобозооспермии. Это трансмембранный протеин, локализованный на акросоме сперматозоида. Он способствует формированию нормальной акросомы, посредством прикрепления ее к ядру сперматозоида. Округлая головка в результате мутации, не позволяет связаться с блестящей оболочкой (zona pellucida) и оплодотворить ооцит. Замечено, что для пациентов с DPY19L2 характерна тотальная глобозооспермия с нормальной или близкой к нормальной концентрацией сперматозоидов в эякуляте. Описан семейный случай глобозооспермии, связанный с носительством делеции в гене DPY19L2 в гомозиготном состоянии. Трое братьев с сохраненной фертильностью (3-7 детей у каждого) оказались гомозиготными носителями дикого (нормального) аллеля. В то время как пятеро из братьев с тотальной глобозооспермией показали носительство делеции DPY19L2 в гомозиготном состоянии. Учитывая близкородственный брак бабушки и деда сиблингов (двоюродные брат и сестра), установлен аутосомно – рецессивный тип наследования мутации. Этот случай показывает. Что кровнородственные браки связаны не только с увеличением риска рождения детей с аутосомно – рецессивной патологией, но и со снижением фертильности в последующих поколениях [7].

PICK1 – цитозольный протеин, находящийся в проакросомальных везикулах округлых сперматозоидов. Он участвует в белковом обмене. Проакросомальные пузырьки не сливаются, вследствие чего формируется округлая головка, и как результат -  неспособность оплодотворения ооцита.

SPATA 16 – протеин, проявляющий свою активность в проакросомальных пузырьках и аппарате Гольджи, который участвует в формировании акросомы и сперматогенезе. Ген был впервые выявлен у 6-ти братьев, у троих из которых определили гомозиготную мутацию [7]. Для носительства мутаций в гене SPATA 16 характерно снижение концентрации сперматозоидов в эякуляте. Мутации в вышеуказанных генах приводят к тотальной глобозооспермии. Поскольку медицине не известны причины, вызывающие такое нарушение, то и отсутствует эффективное лечение. Мужчинам, имеющим подобный эякулят, до того, как был разработан метод ИКСИ, невозможно было помочь и при подобной патологии они считались абсолютно бесплодными. В 1994 году Lundin K и соавт. сообщили о первой успешной беременности у пациента с глобозооспермией с помощью ИКСИ [8]. Однако, большинство исследований отмечают очень низкие показатели оплодотворения, как оказалось методика ИКСИ при первом типе глобозооспермии (тотальная), не давала положительного эффекта, а при втором типе (частичная) – удавалось, редко получить оплодотворение и добиться единичных случаев беременности. В остальных случаях использовалась только донорская сперма.

Однако, в отличие от SPATA16, при которой не было заявлено ни одного положительного результата, беременности посредством ВРТ были достигнуты с активацией ооцита Ca2+-ионофором в программе ИКСИ у пациентов с делецией DPY19L2 [9,10,11].

СЛУЧАЙ ИЗ ПРАКТИКИ. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Супружеская пара обратилась в ООО «ЭКО центр» клиника «АльтраВита» (г. Москва) в апреле 2012 года по направлению сателлитной клиники «Ваш Доктор» (Крым, г. Симферополь) с диагнозом: Бесплодие первичное, обусловленное мужским фактором (глобозооспермия). Код по МКБ 97.4

В анамнезе у супругов: национальность – осетины, отсутствует беременность в течение 2,5 лет регулярной половой жизни без предохранения. Обратились в клинику «Ваш Доктор» для решения репродуктивных планов (ранее проводили «обследование» и искусственную инсеминацию спермой мужа (ИИСМ), в одном из лечебных учреждений по месту жительства). Супружеская пара осмотрена гинекологом и андрологом по принятым стандартам. У мужа в исследуемом эякуляте обнаружена тяжелая форма тератозооспермии – глобозооспермия (со слов мужа, у родственников отмечено бесплодие по мужской линии у двоюродного брата и младшего родного брата, при «отсутствии гинекологических проблем у жен», обследование родственники не проходили). Пациенты направлены в Москву для дообследования и возможного лечение методом ВРТ.

ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ

Осмотр и обследование супругов:

Супруга, 28 лет, менструальная функция не нарушена (менструация с 14,5 лет, по 5 – 6 дней, через 30 дней, регулярно, умеренно). Хронических заболеваний, операций, беременностей в анамнезе не было. Индекс массы тела – 18,72. Гормональный профиль крови на 3-й день менструального цикла: ФСГ – 6,34 мМЕд/мл, ЛГ – 8,54 мМЕд/мл, эстрадиол крови (Е2) – 176 пмоль/л, пролактин – 442 мЕд/л, ТТГ – 2.1 мЕд/л, Т4 свободный – 10,6 пмоль/л.

Экспертное УЗИ – матка и придатки без особенностей, овариальный резерв: количество антральных фолликулов в правом яичнике – 6, в левом яичнике – 6. Гинекологический осмотр – без особенностей. Исследования на инфекции, передающиеся половым путем (ИИПП) – отрицательные.

Супруг, 34 года. Физикальное обследование без особенностей. Проведена предварительная оценка качества спермы (Таблица 1).

Таблица 1

Предварительная оценка качества спермы для ВРТ

Показатели микроскопического исследования эякулята НОРМЫ ВОЗ
Период воздержания 7 суток 3-7 дней
Время разжижения 15 мин <60 мин
Объем эякулята 2,7 мл >1,5 мл
Вязкость эякулята 2,0 см <2,0 см
Цвет эякулята Желтовато-серый Серо-молочный
Агглютинация сперматозоидов Нет Нет
Агрегаты Нет Нет
Эритроциты Нет Нет
Эпителиальные клетки Единичные Единичные
Лейкоциты 0,2 млн/мл ≤1,0 млн./мл
Незрелые половые клетки Единичные 2-4 на 100 сперматозоидов
Концентрация сперматозоидов
Камера анализа ID# CCM-05-UP 95 млн/мл >15 млн./мл
Камера анализа ID# CCM-07-UP 93 млн/мл
Среднее значение: 94 млн/мл
Подвижность сперматозоидов (при t=25°С)
(а) быстрое прямолинейное (>20 μм/с) 20,0 % ≥20 % ≥32 % ≥40 %
(в) медленное прямолинейное (<20 μм/с) 43,0 %
(с) непрямолинейное (<5 μм/с) 3,0 % ≤2 %
(d) неподвижные 34,0 % <60 %
Морфология сперматозоидов (по Крюгеру) ≥4 %
Нормальные формы 0,0 %
Дефекты головки 100,0 %
Дефекты шейки или средней части 19,0 %
Дефекты хвоста 2,0 %
Цитоплазматические капли 18,0 %
Согласно руководству ВОЗ, 5-е издание, 2010

Заключение: Тотальная глобозооспермия (Тип1). У всех сперматозоидов головки круглой формы без акросомы.

Гормональный профиль крови: ФСГ – 1,78 мЕд/мл ЛГ – 2,27 мЕд/мл, эстрадиол – 85 пмоль/л, тестостерон – 20,06 нмоль/л, ТТГ – 2,27 мЕд/мл, пролактин – 243 мЕд/л, ГСПГ – 19 нмоль/л, ИСТ (индекс свободного тестостерона) – 107,8%.

Кариотип – 46 ХY. ПЦР анализ микроделеций (локусы AZFa, AZFb, AZFc) в участках Y хромосомы – делеций не определено.

Исследование сперматозоидов методом N.A.S.U.M* (Native Assessment of Sperm Ultramorphology), была проанализирована ультраморфология 100 сперматозоидов, в их строении выявлены следующие показатели, представленные в таблице 2:

Таблица 2

Результаты исследования сперматозоидов методом N.A.S.U.M

Дефекты строения сперматозоидов, %
Организация хроматина 15
Хромоцентр 29
Ядерная мембрана 54
Митохондриальная оболочка 60
Аксонема 8
Акросома 100
Шейка 30
Мембранные вакуоли 5

Заключение: в 85% головок сперматозоидов выявлена нормальная организация хроматина; 71% головок имеют нормальную организация хромоцентра; 100% сперматозоидов не имеют акросому; мембранные вакуоли отсутствуют у 95% сперматозоидов. Несмотря на отсутствие акросом в 100% сперматозоидов организация хроматина (85%)   и хромоцентра (71%) в целом имеет высокие показатели.

По данному конкретному случаю нельзя сделать вывод, что отсутствие акросомы влияет на организацию хроматина и хромоцентра.

*N.A.S.U.M. (Native Assessment of Sperm Ultramorphology) оптическая система увеличивающая изображение специального микроскопа в 20 000 крат, позволяющая визуализировать в сперматозоидах отдельные хромосомы, акросомальный аппарат, вакуоли, митохондрии, степень конденсации хроматина, целостность мембран спрематозоида. Название метода принадлежит профессору Б. Бартоову (Израиль)¸ разработан метод С.А. Яковенко (Россия, г. Москва, ООО «ЭКО Центр клиника «АльтраВита»)

Программа с донорской спермой супругами не рассматривалась.

Учитывая отсутствие показателей оплодотворения у пациентов с глобозооспермией в программах ЭКО (по данным литературы), совместно с пациентами было принято решение проведения пробного оплодотворения спермой мужа пяти донорских витрифицированных ооцитов в программе ИКСИ. Результат оплодотворения размороженных 5 зрелых ооцитов донора спермой мужа – 0pn5. Данные представлены в таблице 3.

Показатели и качество спермы супруга на день оплодотворения: объем эякулята – 1,0 мл. Концентрация сперматозоидов – 200 млн/мл. Подвижность: a – 0%, b – 8%. Морфологическое исследование сперматозоидов: 0% нормальных форм по Крюгеру. Глобозооспермия (Тип 1).

Таблица 3

Данные пробного оплодотворения программы ИКСИ

Ооцит День 0 День 1 День 2 День 3 День 4 День 5 День 6
1 MII 0pN
2 MII 0pN
3 MII 0pN
4 MII 0pN
5 MII 0pN

В дальнейшем четыре года супружеская пара не посещала врачей и клинику по поводу бесплодия.

Повторное обращение в ноябре 2016 года. Проведено плановое обследование согласно приказа № 107н МЗ РФ, результаты без изменений, как и в 2012 году. Использование донорской спермы супругами не рассматривается. Принято решение, провести программу ИМСИ в коротком протоколе с антагонистами ГнРГ, начальная доза с 3 дня цикла фоллитропин альфа (Гонал-Ф®) – 150 МЕ (суммарная доза -1500 МЕ), с 5 дня ИСО – антагонист ГнРГ – цетрореликс (Цетротид®) 0,25 мг, триггер на 10 день ИСО – хориогонадотропин альфа (Овитрель®) 250 мкг (6500 МЕ). На пункции получено 12 ооцитов (11 из них зрелые ооциты на стадии метафазы второго деления мейоза (МII), 1 – незрелый ооцит (GV)). Проведена активация ооцитов Ca2+-ионофором.

Показатели и качество спермы супруга на день оплодотворения: объем эякулята – 2,0 мл. Концентрация сперматозоидов – 70 млн/мл. Подвижность: a – 15%, b – 21%. Морфологическое исследование сперматозоидов: 0% нормальных форм по Крюгеру. Глобозооспермия (Тип 1).

Оплодотворение методом ИМСИ – 10 ооцитов: 1 ооцит – 2pN, 10 ооцитов – 0pN. На 6 сутки получен эмбрион качества 3ВА, который был криоконсервирован. Данные оплодотворения программы ИМСИ представлены в таблице 4.

Таблица 4

Данные оплодотворения программы ИМСИ

Ооцит День 0 День 1 День 2 День 3 День 4 День 5 День 6
1 MII 2pN 2b 4b 9b 12b 3BA
2 MII 0pN
3 MII 0pN
4 MII 0pN
5 MII 0pN
6 MII 0pN
7 MII 0pN
8 MII 0pN
9 MII 0pN
10 MII 0pN
11 MII 0pN
12 GV

В мае 2017 года проведена еще одна программа ИМСИ (протокол изменен в пользу использования с начала ИСО препарата с ЛГ активностью) с собственными сперматозоидами. В этом случае решено дополнительно провести активацию ооцитов Ca2+-ионофором А23187[A1] [A2] [A3] . Короткий протокол с антагонистами ГнРГ, начальная доза с 2-го дня цикла: фоллитропин альфа (Гонал-Ф®) – 75 МЕ (суммарная доза – 825 МЕ), менотропины ФСГ и ЛГ (Менопур®) – 75 МЕ (суммарная доза ФСГ – 825 МЕ и ЛГ – 825 МЕ), антагонист ГнРГ – цетрореликс (Цетротид®) 0,25 мг с 6 дня ИСО, триггер – гонадотропин хорионический (Московский эндокринный завод ФГУП, Россия) 9 000 МЕ на 12 день менструального цикла. На пункции получено 9 ооцитов (8 из них зрелые ооциты на стадии метафазы второго деления мейоза (МII), 1 – дегенеративный (deg)).

Показатели и качество спермы супруга на день оплодотворения: объем эякулята – 2,0 мл. Концентрация сперматозоидов – 76 млн/мл. Подвижность: a – 9%, b – 24%. Морфологическое исследование сперматозоидов: 0% нормальных форм по Крюгеру. Глобозооспермия (Тип 1).

Оплодотворение методом ИМСИ – 8 ооцитов, активированных Ca2+-ионофором А23187: 6 ооцитов – 2 pN, 2 ооцита – 0pN).

На 5 сутки получен эмбрион качества 3ВА, который перенесен в полость матки, криоконсервирован 1 эмбрион качества 4ВВ на 6 сутки. Данные оплодотворения программы ИМСИ представлены в таблице 5.

Таблица 5

Данные оплодотворения программы ИМСИ с активацией ооцитов Ca2+-ионофором А23187.

Ооцит День 0 День 1 День 2 День 3 День 4 День 5 День 6
1 MII 2pN 2b 4b 6b cod A c.mor B (st)
2 MII 2pN 6b 9b 12b st
3 MII 2pN 3b 5b 7b c.mor 4CC (st)
4 MII 2pN 3b 6b 14b cod B 4BB КРИО
5 MII 2pN 2b 6b 16a cod A    в   9.30

3 BA ET в 17.20

6 MII 2pN 4b 7b 12b c.mor 1C (st)
7 MII 0pN
8 MII 0pN
9 Deg

Подготовка эякулята и активация ооцитов Ca2+-ионофором А23187.

Эякулят обрабатывался методом всплытия. Данный метод позволил избежать центрифугирования в градиенте плотности, т.к. структура клеток значительно отличалась от структуры нормальных сперматозоидов. На разжиженный эякулят, помещенный в пробирку, наслаивалось 2,0 мл HEPES культуральной среды с 5% содержанием белка. Пробирка помещалась в термостат с температурой 37 °С на 30 минут после чего верхняя часть среды перемещалась в чистую пробирку и находилась при комнатной температуре до проведения ИМСИ. Проведение процедуры ИМСИ выполнялось по протоколу, разработанному Палермо (Palermo G., et al, 1992). Для оплодотворения отбирались сперматозоиды демонстрирующие прямолинейное движение. После выполнения ИМСИ ооциты помещались в среду для активации, приготовленную на основе бикарбонатной культуральной среды с добавлением 10 мкМоль/л Ca2+-ионофором А23187. Ооциты активировались в течение 15 минут в СО2 инкубаторе после чего отмывались от кальция ионофора и культивировались.

Наступила беременность. Наблюдение беременности проводилось по месту жительства в Крыму и в клинике «Ваш Доктор» (г. Симферополь). Роды в срок, протекали через естественные родовые пути. Родился здоровый мальчик, весом 3500 г, ростом – 54 см, в состоянии по шкале Апгар 8 – 9 баллов.

В настоящее время на хранении в клинике находится криоконсервированный эмбрион качества 4 ВВ.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

  1. ЭКО ИМСИ с активацией ооцита Ca2+-ионофором А23187 при тяжелой форме тератозооспермии – тотальная глобозооспермии (Тип 1), может дать положительный результат и решить репродуктивные планы в супружестве.
  2. С целью уточнения возможной генетической природы заболевания необходимо провести выявление мутации и делеции в трех генах ответственных за данное состояние: SPATA 16, PICK1 и DPY19L2 у мужа. Рекомендуется обследование и родственников мужа, не имеющих детей.
  3. Проблему генетически обусловленных форм глобозооспермии необходимо учитывать при применении ВРТ. Отсутствие полных данных по этиологическим факторам данного состояния сперматогенеза, немногочисленность случаев успешного применения ВРТ вспомогательных репродуктивных технологий у таких пациентов не позволяют в полной мере оценить степень генетического риска для потомства. С учетом повышения уровня анеуплоидных сперматозоидов у пациентов с глобозооспермией целесообразно обсуждение вопроса о проведении преимплантационной диагностики эмбрионов (ПГД).
  4. Правильно поставленный диагноз по месту жительства (обследование по стандарту) и направление супругов в специализированное медицинское учреждение, а также настойчивое желание, можно сказать и напористость последних, позволили получить положительный результат в высокотехнологичной клинике ВРТ.

Конфликт интересов

Авторы указывают на отсутствие конфликта интересов в данной статье.

Conflict of interest

Authors declare about the absence of conflicts of interests

СПИСОК ЦИТИРОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

  1. Петров Г. Н. Оплодотворение яйцеклеток у человека вне организма. Труды Крымского мединститута. 1957; 17: 25-26.
  2. Thonneau P., Marchand S., Tallec A., Ferial M. L., Ducot B., Lansac J. et al. Incidence and main causes of infertility in a resident population (1,850,000) of three French regions (1988-1989). Hum Reprod. 1991; 6(6): 811-816. doi:10.1093/oxfordjournals.humrep.a137433.
  3. Мужское бесплодие: возможные причины олигоспермии. Доступно по: http://medbe.ru/news/urologiya-i-andrologiya/muzhskoe-besplodie-vozmozhnye-prichiny-oligospermii. Ссылка активна на 25. 03. 2018.
  4. World Health Organization. WHO manual for the standardised investigation and diagnosis of the infertile male. Cambridge: Cambridge University Press; 2000. 5 p. doi:10.1576/toag.2000.2.4.55.
  5. Anton-Lamprecht I., Kotzur B., Schopf E.. Roundheaded human spermatozoa. Fertil Steril. 1976; 27 (6): 685-693. doi: 10.1016/s0015-0282(16)41900-x.
  6. Chansel-Debordeaux I., Dandien S., Bechoua S., Reproduction outcome in globozoospermie men update and prospects, Andrology, 2015,11-01.
  7. Koscinski I., Elinati E., Fossard C., Redin C., Muller J., Velez de la Calle J., Schmitt F., Ben Khelifa M., Ray P. F., Kilani Z., Barratt C. L., Viville S. DPY19L2 deletion as a major cause of globozoospermia. Am J Hum Genet. 2011; 88(3): 344-350. doi: 10.1016/j.ajhg.2011.01.018.
  8. Lundin K., Sjogren A., Nilsson L., Hamberger L. Fertilization and pregnancy after intracytoplasmic microinjection of acrosomeless spermatozoa. Fertil Steril. 1994; 62(6): 1266-1267. doi:10.1016/0020-7292(96)88705-4.
  9. Tejera A., Mollá M., Muriel L., Remohí J., Pellicer A., De Pablo J. L. Successful pregnancy and childbirth after intracytoplasmic sperm injection with calcium ionophore oocyte activation in a globozoospermic patient. Fertility and Sterility. 2008; 90 (4): 1202. e1–5. doi:10.1016/j.fertnstert.2007.11.056.
  10. Egashira A., Murakami M., Haigo K., Horiuchi T., Kuramoto T. A successful pregnancy and live birth after intracytoplasmic sperm injection with globozoospermic sperm and electrical oocyte activation. Fertil Steril. 2009; 92(6): 2037. doi:10.1016/j.fertnstert.2009.08.013 .
  11. Kilani Z., Ismail R., Ghunaim S., Mohamed H., Hughes D., Brewis I. et al. Evaluation and treatment of familial globozoospermia in five brothers. Fertil Steril. 2004; 82(5): 1436-1439. doi:10.1016/j.fertnstert.2004.03.064.

REFERENCES

1.         Petrov G. N. Oplodotvorenie yaitsekletok u cheloveka vne organizma. Trudy Krymskogo medinstituta. 1957; 17: 25-26. (In Russ)

3.         Thonneau P., Marchand S., Tallec A., Ferial M. L., Ducot B., Lansac J. et al. Incidence and main causes of infertility in a resident population (1,850,000) of three French regions (1988-1989). Hum Reprod. 1991; 6(6): 811-816. doi:10.1093/oxfordjournals.humrep.a137433.

4.         Muzhskoe besplodie: vozmozhnye prichiny oligospermi. Dostupno po: http://medbe.ru/news/urologiya-i-andrologiya/muzhskoe-besplodie-vozmozhnye-prichiny-oligospermii. Ssylka aktivna na 25. 03. 2018. (In Russ)

5.         World Health Organization. WHO manual for the standardised investigation and diagnosis of the infertile male. Cambridge: Cambridge University Press; 2000. 5 p. doi:10.1576/toag.2000.2.4.55.

6.         Anton-Lamprecht I., Kotzur B., Schopf E. Roundheaded human spermatozoa. Fertil Steril. 1976; 27 (6): 685-693. doi: 10.1016/s0015-0282(16)41900-x.

7.         Koscinski I., Elinati E., Fossard C., Redin C., Muller J., Velez de la Calle J., Schmitt F., Ben Khelifa M., Ray P. F., Kilani Z., Barratt C. L., Viville S. DPY19L2 deletion as a major cause of globozoospermia. Am J Hum Genet. 2011; 88(3): 344-350. doi: 10.1016/j.ajhg.2011.01.018.

8.     Lundin K., Sjogren A., Nilsson L., Hamberger L. Fertilization and pregnancy after intracytoplasmic microinjection of acrosomeless spermatozoa. Fertil Steril. 1994; 62(6): 1266-1267. doi:10.1016/0020-7292(96)88705-4.

9.         Tejera A., Mollá M., Muriel L., Remohí J., Pellicer A., De Pablo J. L. Successful pregnancy and childbirth after intracytoplasmic sperm injection with calcium ionophore oocyte activation in a globozoospermic patient. Fertility and Sterility. 2008; 90 (4): 1202. 1–5. doi:10.1016/j.fertnstert.2007.11.056.

10. Egashira A., Murakami M., Haigo K., Horiuchi T., Kuramoto T. A successful pregnancy and live birth after intracytoplasmic sperm injection with globozoospermic sperm and electrical oocyte activation. Fertil Steril. 2009; 92(6): 2037. doi:10.1016/j.fertnstert.2009.08.013 .

11. Kilani Z., Ismail R., Ghunaim S., Mohamed H., Hughes D., Brewis I. et al. Evaluation and treatment of familial globozoospermia in five brothers. Fertil Steril. 2004; 82(5): 1436-1439. doi:10.1016/j.fertnstert.2004.03.064.

Сведения «Для корреспонденции»:

Литвинов Владимир Валентинович – кандидат медицинских наук, врач акушер-гинеколог, ООО «ЭКО-центр», клиника «АльтраВита», 117186, г. Москва, ул. Нагорная, д. 4А, e-mail: lvv33@yandex.ru

Сулима Анна Николаевна – доктор медицинских наук, профессор кафедры акушерства, гинекологии и перинатологии ФПМКВК и ДПО Медицинской академии им. С. И. Георгиевского (структурное подразделение) ФГАОУ ВО «КФУ им. В. И. Вернадского», 295017, г. Симферополь, ул. Воровского, 8, e-mail: gsulima@yandex.ru, ORCID ID 0000-0002-2671-6985.

Маклыгина Юлия Юрьевна – врач – генетик, ООО «ЭКО-центр», клиника «АльтраВита», 117186, г. Москва, ул. Нагорная, д. 4А, e-mail: info@altravita-ivf.ru.

Гукасян Марина Гургеновна – врач акушер-гинеколог, ООО «ЭКО-центр», клиника «АльтраВита», 117186, г. Москва, ул. Нагорная, д. 4А, e-mail: info@altravita-ivf.ru

Харитонова Маргарита Александровна – кандидат биологических наук, заместитель заведующей эмбриологической лаборатории, ООО «ЭКО-центр», клиника «АльтраВита», 117186, г. Москва, ул. Нагорная, д. 4А, e-mail: info@altravita-ivf.ru

Ермилова Ирина Юрьевна – кандидат биологических наук, главный эмбриолог, ООО «ЭКО-центр», клиника «АльтраВита», 117186, г. Москва, ул. Нагорная, д. 4А, e-mail: info@altravita-ivf.ru

Клепуков Алексей Александрович – ведущий эмбриолог, ООО «ЭКО-центр», клиника «АльтраВита», 117186, г. Москва, ул. Нагорная, д. 4А, e-mail: info@altravita-ivf.ru

For correspondence:

Litvinov Vladimir Valentinovich – Candidate of Medical Sciences, obstetrician-gynaecologist, LLC «ECO-Center», «AltraVita» clinic, 117186, Moscow, Nagornaya Str., 4A, e-mail: lvv33@yandex.ru.

Sulima Anna Nikolaevna – Doctor of Medical Sciences, Professor, Department of obstetrics, gynecology and perinatology, Medical Academy named after S. I. Georgievsky (structural unit) “V. I. Vernadsky Crimean Federal University», 295017, Simferopol, Vorovsky Str., 8, e-mail: gsulima@yandex.ru, ORCID ID 0000-0002-2671-6985.

Makligina Yuliya Yur’evna – geneticist, LLC «ECO-Center», «AltraVita» clinic, 117186, Moscow, Nagornaya Str., 4A, e-mail: info@altravita-ivf.ru.

Gukasyan Marina Gurgenovna – obstetrician-gynaecologist, LLC «ECO-Center», «AltraVita» clinic, 117186, Moscow, Nagornaya Str., 4A, e-mail: info@altravita-ivf.ru.

Kharitonova Margarita Aleksandrovna – Candidate of Biological Science, deputy head of embryology laboratory, LLC «ECO-Center», «AltraVita» clinic, 117186, Moscow, Nagornaya Str., 4A, e-mail: info@altravita-ivf.ru.

Ermilova Irina Yurievna – Candidate of Biological Science, chief embryologist, LLC «ECO-Center», «AltraVita» clinic, 117186, Moscow, Nagornaya Str., 4A, e-mail: info@altravita-ivf.ru.

Klepukov Aleksey Aleksandrovich - leading embriologist, LLC «ECO-Center», «AltraVita» clinic, 117186, Moscow, Nagornaya Str., 4A, e-mail: info@altravita-ivf.ru.